Epo, čo to je

Erytropoetín (tiež anglický erytropoetín, EPO) je jedným z hormónov obličiek. Chemickou štruktúrou je glykoproteín.

Fyziologická úloha

Erytropoetín je fyziologický stimulátor erytropoézy. Aktivuje mitózu a zrenie erytrocytov z prekurzorových buniek série erytrocytov. Sekrécia erytropoetínu obličkami sa zvyšuje so stratou krvi, rôznymi anemickými stavmi (anémia železa, folátu a B12, anémie spojené s léziami kostnej drene atď.) A ischémiou obličiek (napríklad s traumatickým šokom), s hypoxickými stavmi.

Vylučovanie erytropoetínu obličkami sa tiež zvyšuje pod vplyvom glukokortikoidov, čo je jeden z mechanizmov rýchleho zvýšenia hemoglobínu a schopnosti krvi dodávať kyslík za stresových podmienok. Hladina hemoglobínu a počet erytrocytov v krvi sa zvyšujú v priebehu niekoľkých hodín po podaní exogénneho erytropoetínu.

Erytropoetín spôsobuje zvýšený príjem kostnej drene železom, meďou, vitamínom B12 a folátom, čo vedie k zníženiu plazmatických hladín železa, medi a vitamínu B12, ako aj zníženiu hladín transportných proteínov - feritínu a transkobalamínu.

Erytropoetín zvyšuje systémový krvný tlak. Zvyšuje tiež viskozitu krvi zvýšením pomeru hmotnosti erytrocytov k plazme.

Mechanizmus tvorby erytropoetínu

Rozhodujúcim faktorom pri tvorbe erytropoetínu je kyslíkový režim v celom organizme a najmä v obličkách. Štruktúrnym základom tejto funkcie je proteín-cytochróm obsahujúci hem. Oxy forma tohto proteínu inhibuje produkciu IGF-1 (faktor indukovaný hypoxiou), ktorý nastáva, keď tlak v obličkách klesá z 20 na 40 mm Hg. Redukovaná forma vedie k zvýšeniu aktivity IGF-1, v dôsledku čoho vzniká erytropoetín. Aktiváciou enzýmov (fosfolipáza, ktorá zvyšuje aktivitu prostaglandínov) sa stimuluje produkcia erytropoetínu.

Mechanizmus účinku a norma hormónu erytropoetínu v krvi zdravého človeka

Hormón erytropoetín je produkovaný obličkovými bunkami av malej miere pečeňou. Bol študovaný od roku 1905, od doby, keď francúzsky Carl Paul Carnot začal svoj výskum. Potom napísal prvé dielo na tému - erytropoetín, čo to je. Stručne povedané, ide o lykoproteínový náboj súvisiaci s funkciou krvi. Ako to funguje a čo spôsobuje jeho nedostatok alebo prebytok v tele možno nájsť ďalej.

Hormonálne funkcie

Erytropoetín sa produkuje v hypoxii alebo hladovaní kyslíkom na molekulárnej úrovni. Po vstupe do inertného mozgu vyvoláva erytropoetín syntézu červených krviniek alebo červených krviniek. A už červené krvinky sa začnú šíriť do všetkých orgánov osoby tak potrebného kyslíka.

Počet červených krviniek v krvi sa neustále znižuje v dôsledku ich krátkeho života, niečo okolo 3 mesiacov. S poklesom ich počtu klesá a obsah kyslíka v tele. Preto je hormón erytropoetín nevyhnutný pre človeka neustále, na obnovu erytrocytov a udržiavanie ich množstva v krvi na požadovanej úrovni.

Nemali by sme zabúdať na extrémne prípady nedostatku kyslíka, napríklad s veľkou stratou krvi alebo významnou fyzickou námahou, keď sa potreba kyslíka výrazne zvyšuje.

Musíte tiež pochopiť, že erytropoéza, proces tvorby krvi, nemôže pokračovať bez „stavebného materiálu“, v tomto prípade železa, vitamínu B12 a kyseliny listovej. Takže spolu s EPO by mal človek konzumovať dostatočné množstvo týchto prvkov s jedlom alebo v čistej forme v tabletkách alebo injekciách.

Norma erytropoetínu v krvi zdravého človeka by mala byť 4,3 - 29 mIU / ml. Pri dlhodobejšej fyzickej námahe sa však táto rýchlosť niekoľkokrát zvyšuje. Tento jav sa vyskytuje v telách športovcov alebo ľudí pracujúcich v ťažkej fyzickej práci. Vo svojom tele musí byť hormón produkovaný kontinuálne a vo veľkých množstvách.

Akékoľvek porušenie hladiny erytropoetínu naznačuje, že v tele existuje nejaká patológia. Osoba má problémy s obličkami, pečeňou, kostnou dreňou alebo metabolizmom. V každom prípade sa pre presnú diagnózu vykoná krvný test na erytropoetín a vyšetria sa vnútorné orgány.

Krvný test

Analýza erytropoetínu sa vykonáva za účelom stanovenia príznakov anémie a jej typu. Tento stav sa vyznačuje nízkym obsahom červených krviniek a teda erytropoetínu.

Anémia môže byť mierna a závažná. Posledne uvedený stav je nebezpečný, pretože bez správnej liečby sa stav pacienta zhorší v dôsledku neustále sa vyvíjajúceho ochorenia.

Analýza sa vykonáva pravidelne v prípadoch chronického ochorenia obličiek alebo pečene. Takéto monitorovanie stavu krvi je nevyhnutné, aby sa zabránilo prudkému zhoršeniu stavu človeka.

S vysokým obsahom červených krviniek v krvi je tiež priradená analýza erytropoetínu. Koniec koncov, je dôležité zistiť, čo spôsobilo nárast hormonálnej aktivity. A okrem toho, množstvo červených krviniek v krvi môže spôsobiť trombózu, ktorá môže v konečnom dôsledku viesť k zablokovaniu veľkej cievy a smrti osoby.

Vysoká hladina erytropoetínu

Zvýšený obsah erytropoetínu s nízkym počtom erytrocytov je omnoho bežnejší ako opačná situácia.

Takéto stavy môžu spôsobiť rôzne patológie:

  1. Zriedkavé ochorenie je čistá aplázia červenej kostnej drene. Vyznačuje sa nízkym obsahom červených krviniek, zatiaľ čo hladina leukocytov a krvných doštičiek zostáva normálna.
  2. Chronická strata krvi vedie k vysokému obsahu erytropoetínu v krvi. Napríklad so slabým krvácaním z análneho sfinktera alebo gastrointestinálnych ochorení.
  3. Anémia môže spôsobiť nedostatok stopových prvkov zapojených do konštrukcie červených krviniek. Ide o kyselinu listovú, železo, vitamín B12. To znamená, že v kostnej dreni je veľa hormónov, ale nie je nič na stavbu krvných buniek.
  4. V tele sa môže vyvinúť akýkoľvek typ leukémie.
  5. Keďže erytropoetín a iné hormóny sa produkujú v obličkách a nadobličkách, zvýšená hladina týchto látok v krvi môže byť spôsobená výskytom nádoru v obličkách. Vo všeobecnosti, akékoľvek poškodenie obličiek vedie k porušeniu hladiny erytropoetínu - kompresný úder, prasknutie tepny a tak ďalej.
  6. Hladiny erytropoetínu sa zvyšujú pri chronickej bronchitíde alebo inom vírusovom ochorení.
  7. Predávkovanie hormónom vedie k srdcovému zlyhaniu a stáze krvi.

Všeobecne platí, že na určenie príčiny zvýšených hladín erytropoetínu sa musí človek podrobiť takmer úplnému vyšetreniu vnútorných orgánov a ciev pomocou rôznych zdravotníckych zariadení - ultrazvuku, röntgenového EKG, počítačovej tomografie a podobne.

Nízky obsah erytropoetínu

Nízky obsah erytropoetínu je oveľa menej častý a spôsobuje veľmi obmedzený počet patológií:

  1. Chronické zlyhanie obličiek je hlavným dôvodom zníženia obsahu erytropoetínu v krvi.
  2. Dialyzačný postup tiež znižuje obsah erytropoetínu, ale v tomto prípade sa rýchlosť rýchlo obnoví.
  3. Pri chorobách kostnej drene, konkrétne pri proliferácii, nehrá úlohu množstvo hormónu v krvi. Preto sa nezávisle znižuje.
  4. Znížiť obsah erytropoetínu môže dostať niektoré lieky steroidný typ.
  5. Gravidita je často sprevádzaná nízkym obsahom erytropoetínu.

Analýza erytropoetínu

Na to, aby výsledok analýzy erytropoetínu odrážal skutočný obraz, je potrebné pozorovať niekoľko podmienok. Pred analýzou 3-5 dní je potrebné odmietnuť užívanie steroidných a hormonálnych liekov. Ak to podľa svedectva nie je možné, laboratórny technik by mal byť na to upozornený, aby pri dekódovaní výsledkov urobil potrebné opravy. Tiež pred analýzou nemôže urobiť transfúziu krvi alebo dialýzu. 2-3 dni pred analýzou musíte prestať hrať šport alebo tvrdú fyzickú prácu.

A posledná podmienka - všetky testy na hormóny sa vykonávajú nalačno, vrátane erytropoetínu. Takže pred darovaním krvi nemôžete nič jesť po 7-8 hodín a môžete piť len čistú vodu.

Normalizácia erytropoetínu

Keď sa zaoberáme otázkou, čo je erytropoetín, je zrejmé, že normalizácia jeho hladiny v krvi závisí od liečby patológie nerovnováhy hormónu. To znamená, že po odstránení cysty z obličiek alebo liečbe vírusového ochorenia sa hladina hormónov čoskoro vráti do normálu.

Na urýchlenie tohto procesu však farmakológia vyvinula niekoľko liekov, ktoré pomáhajú rýchlejšie produkovať erytropoetín. Alebo ho nahradiť počas trvania liečby syntetickými analógmi. Tieto lieky sa tiež predpisujú pacientom s anémiou a chronickým ochorením obličiek. Môže to byť Epoetin, Erythrostim, Recormon alebo Vero-epoetín. Všetky lieky predpisuje len lekár, po vykonaní všetkých potrebných testov a absolvovaní ďalších diagnostických postupov.

Všetky uvedené lieky sú predpísané pre veľmi špecifické ochorenia:

  1. Pri chronickom zlyhaní obličiek.
  2. S benígnym nádorom obličiek alebo nadobličiek. Používajú sa tiež počas rekonvalescencie pacienta po chirurgickom zákroku na odstránenie nádoru.
  3. Lieky sú zaradené do komplexu rehabilitačných opatrení po tom, čo pacient podstúpi chemoterapiu.
  4. S anémiou najviac odlišného typu.
  5. Lieky sa používajú ako preventívne opatrenie, pred operáciou, s možnou stratou krvi.
  6. Pri kŕmení dieťa narodené s nedostatkom hmotnosti alebo predčasné.

Lieky majú veľa vedľajších účinkov a pri nesprávnom dávkovaní alebo režime môžu spôsobiť zdravotné následky.

Ak má osoba ťažkú ​​bolesť hlavy, nevoľnosť, závraty, vracanie, hnačku a záchvaty, okamžite vyhľadajte lekára.

Existujú alternatívne lieky. Neobsahujú čistý hormón erytropoetín, ale epoetín beta. Inak sa táto látka nazýva rekombinantný glykoproteín. Skladá sa zo 150 aminokyselín, ktoré mu umožňujú vytvárať červené krvinky z deterministických buniek.

Pretože zloženie tohto lieku je veľmi podobné skutočnému hormónu, môže byť podávané subkutánne alebo intravenózne. Rýchlosť lieku nie je horšia ako prirodzený hormón, ktorý umožňuje zvýšiť nielen úroveň červených krviniek, ale aj hemoglobínu.

Ďalšou výhodou epoetínu beta je, že obsahuje železo, to znamená stavebný materiál na výrobu červených krviniek. Lieky s epoetínom beta sa teda ocitli nielen v medicíne, ale aj v športe. Ako účinok z neho prichádza už v 15 po injekcii.

Erytropoetín v športe

Vplyv erytropoetínu na telo, poznajú a športových trénerov. Preto prípravky obsahujúce tento hormón sú široko používané v športe. Hoci Medzinárodný olympijský výbor uznal tieto látky ako doping v roku 1990. Zložitosť monitorovania dodržiavania požiadaviek MOV spočíva v tom, že erytropoetín živočíšneho pôvodu je v tele veľmi ťažké určiť.

Ale koniec koncov, pravdou je, že tento hormón vzniká v tele v čase najväčšej záťaže, to znamená počas súťaže. Musí tam byť, inak človek zomrie. A jeho nízka úroveň je skôr alarmujúcim znamením, ale nie normou. Vyskytli sa však prípady smrti a rekombinantného erytropoetínu. Koncom deväťdesiatych rokov zomrelo niekoľko cyklistov.

Tak či onak, je takmer nemožné identifikovať športovca zneužívajúceho erytropoetín, preto športovci z celého sveta používajú drogy obsahujúce tento hormón na vlastné riziko, pričom opakovane zvyšujú svalovú silu, a čo je najdôležitejšie - ich vytrvalosť.

Epo, čo to je

Erytropoetín je glykoproteínový hormón, presnejšie cytokín, hlavný regulátor erytropoézy, ktorý stimuluje tvorbu červených krviniek z neskorých progenitorových buniek a zvyšuje výťažok retikulocytov z kostnej drene v závislosti od spotreby kyslíka. Pokiaľ nie je poškodené okysličovanie tkanív, koncentrácia erytropoetínu, ako aj počet červených krviniek v krvi, zostáva konštantná. Produkcia erytropoetínu je regulovaná na úrovni transkripcie jeho génu a keďže jediným fyziologickým stimulom, ktorý zvyšuje počet buniek syntetizujúcich erytropoetín, je hypoxia, nie je produkcia ani metabolizmus erytropoetínu závislý od jeho plazmatickej koncentrácie. V tele zdravého človeka je približne 2,3 x 10 ^ 13 erytrocytov, ktorých životnosť je v priemere 120 dní. V dôsledku toho by mala byť skupina červených krviniek v tele neustále aktualizovaná rýchlosťou približne 2,3 buniek za sekundu. Systém diferenciácie erytroidných buniek by mal byť prísne regulovaný, aby sa udržiavala konštantná úroveň cirkulujúcich červených krviniek za normálnych podmienok. Okrem toho musí byť tento systém vysoko citlivý na zmeny množstva kyslíka v tele. V súčasnosti sa získalo množstvo údajov, ktoré naznačujú, že kľúčovým faktorom, ktorý riadi diferenciáciu erytroidných buniek, je erytropoetín cirkulujúci v krvi.

Erytropoetín je extrémne aktívny hormón, ktorý pôsobí v tele v pikomolárnych koncentráciách. Malé fluktuácie jeho koncentrácie v krvi vedú k významným zmenám v rýchlosti erytropoézy a normálny rozsah jej koncentrácií sa pohybuje od 4 do 26 IU / l. Preto, pokiaľ koncentrácia hemoglobínu klesne pod 105 g / l, koncentrácia erytropoetínu neprekročí špecifikovaný rozsah a nie je možné identifikovať jeho zvýšenie (pokiaľ nepoznáte jeho počiatočné hodnoty). Erytrocytóza vedie k potlačeniu tvorby erytropoetínu mechanizmom negatívnej spätnej väzby. Je to spôsobené nielen zvýšeným prívodom kyslíka do tkanív v dôsledku zvýšenia počtu cirkulujúcich erytrocytov, ale aj zvýšením viskozity krvi. Pre športovca to znamená zníženie produkcie vlastného hormónu so zavedením exogénneho a porušením mechanizmov regulujúcich produkciu červených krviniek. Preto pri použití erytropoetínu v športe ako dopingu by mal športovec premýšľať o budúcnosti tvorby červených krviniek v tele.

Dopingové testy [upraviť]

Spravidla sa erytropoetín deteguje vo vzorkách moču alebo krvi. V krvi je detekovaná s väčšou pravdepodobnosťou ako v moči. Polčas je 5-9 hodín, to znamená, že pravdepodobnosť detekcie je významne znížená po 2-3 dňoch.

Heparín sa používa ako maskovacie činidlo [1]. Použije sa tiež zavedenie proteáz do močového mechúra cez katéter. [2]

Fyziologická úloha erytropoetínu [upraviť] t

Po dlhú dobu zostala otázka buniek normálne produkujúcich erytropoetín otvorená. Toto bolo primárne kvôli nedostatku priamych metód na identifikáciu buniek, ktoré syntetizujú hormón. Bunky boli identifikované nepriamymi metódami, vrátane schopnosti určitých tkanivových kultúr syntetizovať produkt in vitro. Predpokladá sa, že hlavnými kandidátmi na úlohu buniek produkujúcich EPO sú glomerulárne bunky, ako aj bunky proximálneho tubulu. Klonovanie erytropoetínového génu, ako aj vývoj in situ hybridizačných metód, ktoré umožňujú identifikáciu priamo buniek, v ktorých dochádza k expresii určitých génov, zmenilo chápanie povahy buniek syntetizujúcich erytropoetín. In situ hybridizácia ukázala, že bunky, ktoré syntetizujú erytropoetínovú mRNA nie sú glomerulárne alebo tubulárne. Zdá sa, že intersticiálne bunky alebo kapilárne endotelové bunky sú hlavným miestom syntézy EPO v obličkách. Ako už bolo uvedené, hlavným faktorom regulujúcim produkciu EPO je hypoxia. Za hypoxických podmienok sa množstvo EPO cirkulujúceho v plazme zvyšuje približne 1000-krát a dosahuje 5 až 30 U / ml. V mnohých experimentoch s izolovanou obličkou sa ukázalo, že obsahuje senzory, ktoré reagujú na zmeny koncentrácie kyslíka.

Ďalší J. Schuster a pracovníci v roku 1987 skúmali kinetiku produkcie erytropoetínu v reakcii na hypoxiu. Ukázalo sa, že približne 1 hodinu po vzniku hypoxie sa zvyšuje množstvo mRNA erytropoetínu v obličkách a mRNA sa naďalej akumuluje počas 4 hodín, keď sa odstráni hypoxia, hladina EPO mRNA sa rýchlo znižuje. Zmeny v množstve plazmy a renálneho erytropoetínu, detegované pomocou protilátok špecifických pre erytropoetín, sa vyskytujú striktne paralelne so zmenou množstva mRNA so zodpovedajúcim oneskorením. Výsledky získané v tejto práci ukazujú, že počas hypoxie je produkcia EPO stimulovaná de novo.

V laboratóriu S. Konryho v roku 1989 sa študoval proces indukcie syntézy EPO metódou in situ hybridizácie na tkanivových rezoch obličkovej kôry. Zistilo sa, že pri podmienkach anémie sa významne zvyšuje produkcia EPO, hoci intenzita hybridizácie s EPO mRNA v jednotlivých bunkách zostáva nezmenená. Ukázalo sa, že zvýšená produkcia EPO je spojená so zvýšením počtu buniek syntetizujúcich hormón. Ako sa obnovuje normálny hematokrit, počet buniek syntetizujúcich erytropoetín rýchlo klesá a kinetika zmeny koreluje s kinetikou znižovania množstva EPO mRNA a cirkulujúceho hormónu. Z údajov histologickej analýzy vyplýva, že EPO je syntetizovaný intersticiálnymi bunkami kortikálnej časti obličky.

Ukázalo sa, že 5 až 15% erytropoetínu v plazme u dospelých má extrarenálny pôvod. A ak v embryách je hlavným miestom syntézy erytropoetínu pečeň, v dospelom organizme je pečeň tiež hlavným orgánom produkujúcim EPO, ale extrarenálny. Tento záver bol potvrdený v nedávnych experimentoch na detekciu EPO mRNA v rôznych orgánoch. Zdá sa, že zmena hlavného miesta syntézy EPO počas ontogenézy je geneticky determinovaná udalosť.

Syntéza erytropoetínu v tele je sprostredkovaná významným množstvom biochemických kofaktorov a stimulantov. Predpokladá sa, že hypoxia vedie k poklesu hladiny kyslíka v špecifických senzorických bunkách obličiek, čo spôsobuje zvýšenie produkcie prostaglandínov v glomerulárnych bunkách. Ukázalo sa, že prostaglandíny hrajú dôležitú úlohu pri stimulácii produkcie erytropoetínu. Inhibítory syntézy prostaglandínov majú supresívny účinok na produkciu EPO počas hypoxie. Hlavný príspevok k biosyntéze prostaglandínov počas hypoxie je zrejme spôsobený cyklooxygenázovým systémom. Počas hypoxie (ako aj so zavedením iónov kobaltu) sa v obličkách uvoľňujú neutrálne proteázy a lyzozomálne hydrolázy, ktoré, ako sa ukázalo, tiež stimulujú produkciu EPO. Zdá sa, že uvoľňovanie lyzozomálnych enzýmov je spojené so zvýšením produkcie cGMP. Ukázalo sa, že lyzozomálne enzýmy sú aktivované za účasti proteínkináz, ktoré sú zase aktivované cAMP.

Počas hypoxie sa pozoruje indukcia aktivity fosfolipázy A2, ktorá vedie k zvýšeniu hladiny arachidonátov, ktoré sa za účasti cyklooxygenázy konvertujú na endoperoxidy. Je potrebné poznamenať, že hypoxia je optimálnou podmienkou aktivity cyklooxygenázy. Je pravdepodobné, že vápnikový systém hrá dôležitú úlohu v týchto biochemických udalostiach: ióny vápnika stimulujú aktivitu fosfolipázy A a tvorbu prostaglandínu. Prostanoidy zase môžu indukovať aktivitu adenylátcyklázy a spúšťať kaskádu biochemických javov vedúcich k fosforylácii a aktivácii hydroláz. Aká je úloha hydroláz a čo je reťazec, ktorý v konečnom dôsledku vedie k zvýšenej syntéze EPO, zostáva nejasný. Niektoré hormóny hypotalamicko-hypofyzárneho systému, hormónov štítnej žľazy a niektorých steroidných hormónov majú tiež stimulujúci účinok na biosyntézu EPO. Špecifickým induktorom produkcie EPO sú ióny kobaltu, ktorých mechanizmus účinku na systém biosyntézy EPO ešte nie je jasný. Tento systém je atraktívnym experimentálnym modelom na štúdium indukcie biosyntézy EPO.

Molekula ľudského erytropoetínu, v ktorej sacharidová zložka predstavuje 40 až 50% molekulovej hmotnosti (molekulová hmotnosť glykoproteínu je 32 až 36x103A. E. M., a vypočítaná molekulová hmotnosť proteínovej časti je 18 399 x 10 3 a). m.), sa skladá z 193 aminokyselinových zvyškov. Hodnota izoelektrického bodu EPO je nízka (pH 3,5 - 4,0), čo je spôsobené prítomnosťou sialových kyselín v koncových polohách sacharidových reťazcov erytropoetínu. Izoelektrická fokusácia plazmového EPO v polyakryamidovom géli umožňuje identifikovať niekoľko frakcií, ktoré sú identické v molekulovej hmotnosti, ale líšia sa veľkosťou izoelektrických bodov, čo indikuje heterogenitu štruktúry sacharidovej časti hormónu. Štiepenie sialových kyselín počas liečby neuraminidázou alebo počas kyslej hydrolýzy vedie k strate stability hormónu in vivo, ale neovplyvňuje jeho aktivitu in vitro. V štyroch miestach sú glykozidové zvyšky pripojené k proteínovému reťazcu, ktorý môže predstavovať rôzne cukry, preto existuje niekoľko druhov EPO s rovnakou biologickou aktivitou, ale trochu odlišných vo svojich fyzikálno-chemických vlastnostiach.

V dôsledku analýzy aminokyselinovej sekvencie ľudského erytropoetínu boli identifikované tri potenciálne N-glykozylačné miesta, ktoré zahŕňajú konsenzus sekvenciu Asn-X-Ser / Thr. V experimentoch na liečenie hormónu N-glykozidázou, špecificky štiepením oligosacharidových reťazcov spojených s asparagínovým zvyškom N-glykozidovou väzbou, sa potvrdilo, že v molekule EPO sú tri N-glykozylačné miesta. V dôsledku experimentov na ošetrenie hormónu s O-glykozidázou sa zistilo, že obsahuje aj oligosacharidové reťazce spojené s proteínovou časťou O-glykozidickými väzbami.

Gén erytropoetínu (Gene: [07q21 / EPO] erytropoetín) pozostáva z piatich exónov a štyroch intrónov. Gén kóduje proteín pozostávajúci z 193 aminokyselinových zvyškov. Identifikovali sa štyri typy RNA podieľajúce sa na interakcii s génom erytropoetínu a dva typy sú zastúpené v extraktoch po zavedení chloridu kobaltnatého s výrazne nižším počtom kópií ako v normálnych extraktoch. Tieto údaje poukazujú na prítomnosť negatívnych regulačných faktorov (pravdepodobne ribonukleoproteínov) podieľajúcich sa na regulácii expresie génu erytropoetínu. Predpoklad negatívnej regulácie expresie génu EPO bol potvrdený Semenzou G. a zamestnancami v roku 1990, ktorí dostali sériu transgénnych myší nesúcich kódujúcu časť ľudského EPO génu a rôzne fragmenty S-lemujúcej oblasti. Analýza génovej expresie v rôznych transgénoch umožnila identifikovať tri regulačné elementy ľudského erytropoetínového génu:

  • pozitívny regulačný prvok nevyhnutný na indukciu expresie génu erytropoetínu v pečeni;
  • negatívny regulačný prvok;
  • regulačný element nevyhnutný pre expresiu indukovateľného génu v obličkách.

Experimentálne sa ukázalo, že existujú dve iniciačné miesta pre transkripciu génu erytropoetínu, ktoré nesú viac iniciačných miest. Za normálnych podmienok sa iniciuje transkripcia z obmedzeného počtu miest umiestnených na oboch miestach. Po indukcii anémie alebo liečbe chloridom kobaltu sa zvyšuje počet funkčných miest na iniciáciu transkripcie v oboch miestach. Vo všetkých prípadoch je príprava erytropoetínu obmedzená ťažkosťami spojenými s izoláciou a kultiváciou buniek, nestabilitou produkcie hormónu a nakoniec jeho nízkou koncentráciou v kultivačných tekutinách.

Zásadne odlišný prístup k získaniu veľkých množstiev vysoko purifikovaného EPO bol spojený s použitím metód génového a bunkového inžinierstva. Uskutočnil sa pokus vytvoriť bakteriálneho producenta erytropoetínu. Proteín produkovaný v Escherichia coli je rozpoznávaný protilátkami proti EPO a má molekulovú hmotnosť približne ekvivalentnú deglykozylovanému ľudskému EPO. Je známe, že bakteriálne bunky majú glykozylačný systém, ktorý je zásadne odlišný od eukaryotického systému. Preto nie je možné získať správne glykozylovaný proteín v bakteriálnych bunkách. V prípade EPO má zásadný význam získanie správne glykozylovaného glykoproteínu. V dôsledku toho je vytvorenie hormónového výrobcu na báze bakteriálnych buniek nepraktické. Účinný producent biologicky aktívneho erytropoetínu in vitro aj in vivo sa môže získať len na základe buniek vyšších zvierat.

V štúdii vlastností rekombinantného EPO sa ukázalo, že prítomnosť nekompletnej sacharidovej zložky (molekulová hmotnosť erytropoetínu syntetizovaného v tomto systéme je 23 x 10 3 a.e. m) neovplyvňuje aktivitu hormónu in vitro, ale významne znižuje jeho aktivitu in vivo., Súčasne úplná eliminácia sacharidovej časti pomocou glykozidáz vedie k 80% strate biologickej aktivity hormónu v in vitro teste. Tieto údaje sú v konflikte s existujúcimi myšlienkami, že sacharidová zložka EPO nie je nevyhnutne nevyhnutná pre jeho aktivitu in vitro.

Historické pozadie [upraviť]

V roku 1989 bola vykonaná podrobná analýza štruktúry rekombinantného EPO získaného transfekciou buniek z vaječníkov čínskeho škrečka do ľudského EPO genómu. Zistilo sa, že v bunkách sa syntetizujú dva typy EPO (nazývané bi- a tetra-formy), ktoré sa líšia stupňom vetvenia N-viazaných sacharidových reťazcov. Dvojzložková EPO obsahujúca menej rozvetvenú sacharidovú zložku sa významne líši v biologickej aktivite od natívneho erytropoetínu použitého ako štandard: biologická aktivita dvojformného EPO in vivo je 7 krát nižšia a in vitro 3 krát vyššia. Biologická aktivita tetra-formy EPO je veľmi blízka aktivite natívneho EPO. Tieto údaje naznačujú významnú úlohu štruktúry sacharidovej zložky pre biologickú aktivitu erytropoetínu in vivo. Zdá sa, že vyššia in vitro aktivita týchto foriem erytropoetínu, ktoré obsahujú nekompletnú sacharidovú zložku, je spojená so uľahčením interakcií erytropoetínu s receptormi. Je zrejmé, že je to práve sacharidová zložka, ktorá zaisťuje stabilitu hormónu v tele a zodpovedajúco vysokú úroveň biologickej aktivity v testoch in vivo.

V polovici 80. rokov sa prvý rekombinantný erytropoetín získal zavedením ľudského génu EPO (lokalizovaného u ľudí na siedmom chromozóme v oblasti 11q-12q) do ovariálnych škrečkov. Rekombinantný ľudský p-EPO získaný genetickým inžinierstvom (recormon) je v zložení aminokyselín identický s prirodzeným ľudským EPO. Recormon poskytuje flexibilný a ekonomický spôsob efektívnej liečby anémie v kombinácii s vysokým bezpečnostným profilom a výbornou znášanlivosťou. Použitie Recormonu významne znižuje potrebu transfúzií krvi, ktoré sú zďaleka najbežnejšou metódou korekcie anémie. Podľa mnohých štúdií teda použitie Recormonu umožňuje obnovenie normálnych hladín hemoglobínu a elimináciu potreby náhradných krvných transfúzií u pacientov s rakovinou trpiacich anémiou. Zároveň dochádza k výraznému zlepšeniu kvality života týchto pacientov; Riziko infekcie, ktoré sa vyskytuje, keď sa anémia koriguje pomocou krvných transfúzií počas liečby vírusových infekčných ochorení, ako je HIV a hepatitída C. Recormon sa vyrába ako vhodné zariadenie na podávanie a indikáciu lieku (injekčné pero).

Existujú však malé rozdiely v zložení glykozidových zvyškov, ktoré ovplyvňujú fyzikálno-chemické vlastnosti celej molekuly hormónu. Napríklad sa zistili určité rozdiely v distribúcii elektrického náboja pre jednotlivé typy erytropoetínu. Erytropoetínové prípravky vyrábajú rôzne farmaceutické spoločnosti v piatich typoch: alfa, beta, retard (NESP), theta a omega).

Od roku 1988 sa používajú alfa-EPO a beta-EPO. Keď je subkutánne, ich biologická dostupnosť je asi 25%, maximálna koncentrácia v krvi - 12-18 hodín, polčas - až 24 hodín (s intravenóznym podaním - 5-6 hodín). Erytropoetín retard (NESP) sa používa už niekoľko rokov a trvá dlhšie ako iné lieky EPO. Theta-EPO je dnes považovaný za najúčinnejší a najmenej alergénny, má najvyšší stupeň čistoty. Je to spôsobené tým, že sa získava metódami genetického inžinierstva v ľudských bunkách (niektorí bezohľadní športovci a športoví lekári sa domnievajú, že je to nezistiteľné). V skutočnosti je theta-EPO len 99% identický s človekom. Omega-EPO, ktorý sa získava z obličiek škrečkov, sa líši najviac od všetkých ostatných prípravkov EPO z človeka, preto je najľahšie zistiť. Predáva sa len vo východnej Európe a Južnej Amerike.

Prípravky erytropoetínu [upraviť] t

Rekombinantný biologicky analogický a-EPO od rôznych výrobcov, dokonca aj s pozitívnym stanoviskom Výboru pre lieky na humánne použitie (CHMP) Európskej agentúry pre lieky, môže mať rôzne vlastnosti, stupeň čistoty a čo je najdôležitejšie, má odlišnú biologickú aktivitu, Keď sa analyzovali erytropoetínové prípravky rôznych výrobcov, u 5 z 12 študovaných produktov sa zistili významné odchýlky v sile pôsobenia medzi rôznymi sériami, v troch vzorkách - neprijateľné hladiny bakteriálnych endotoxínov.

Ďalšou štúdiou bolo porovnanie 11 prípravkov EPO (získaných od ôsmich výrobcov), zastúpených na trhoch mimo EÚ a z hľadiska obsahu, účinnosti a izoformného zloženia účinnej látky (erytropoetínu). In vitro bioaktivita sa pohybovala medzi 71–226%, zatiaľ čo výkonnosť 5 vzoriek nespĺňala špecifikácie. Medzi odchýlkami v zložení izoformy sú uvedené: prítomnosť jednej alebo viacerých ďalších kyslých a (alebo) bázických izoforiem, ako aj modifikovaný podiel rôznych izoforiem. Rozdiely medzi sérami boli tiež identifikované; Niektoré výrobky nespĺňali svoje vlastné špecifikácie, to znamená, že výrobcovia neposkytli primeranú kontrolu výrobných procesov. Množstvo aktívnej zložky tiež nie vždy zodpovedá uvedenému. Takéto odchýlky od uvedených parametrov môžu mať významný klinický význam, pretože môžu viesť k predávkovaniu alebo naopak k zavedeniu nižšej dávky. Tieto údaje jasne poukazujú na hrozbu použitia rekombinantných erytropoetínov bez lekárskych indikácií.

Lekárske použitie [upraviť]

V lekárskej praxi sa erytropoetín používa na liečbu anémie rôzneho pôvodu, vrátane pacientov s rakovinou, pacientov s chronickým zlyhaním obličiek. Pretože, ako je uvedené vyššie, sa v tele vytvára endogénny erytropoetín, pacienti s chronickým zlyhaním obličiek vždy trpia anémiou. Okrem toho sa pozoruje zníženie koncentrácie EPO v ľudskej krvnej plazme, a teda počet erytrocytov, pri nasledujúcich patologických stavoch a ochoreniach: t

  • sekundárna polycytémia;
  • nedostatočná stimulácia vlastného EPO;
  • benígne ochorenie obličiek (hydronefróza);
  • všeobecná hypoxia tkaniva;
  • zhoršené zásobovanie obličkami
  • znížená koncentrácia kyslíka v prostredí;
  • chronická obštrukčná choroba pľúc;
  • ochorenia kardiovaskulárneho systému (výtok krvi sprava doľava);
  • abnormality štruktúry molekuly hemoglobínu (kosáčikovitá anémia);
  • účinky na telo oxidov uhlíka v dôsledku fajčenia;
  • artérioskleróza renálnej artérie;
  • odmietnutie transplantátu;
  • renálna aneuryzma.

Pred výskytom rekombinantného erytropoetínu sa u týchto pacientov pravidelne uskutočňovala hematransfúzia tak celej krvi, ako aj hmotnosti erytrocytov. Od roku 1989 však potreba takýchto postupov zanikla, pretože boli nahradené zavedením erytropoetínových prípravkov. V niektorých prípadoch je anémia iného pôvodu tiež úspešne liečená rekombinantným EPO. Skutočnosť, že zavedenie rekombinantného EPO indukuje ďalšiu erytropoézu aj pri úplne intaktnej endogénnej úrovni EPO, sa používa autológnymi darcami krvi. Ako alternatíva k transfúzii červených krviniek sa ukazuje, že liečba vysokými dávkami EPO je účinným anti-anemickým opatrením ako sprievodná liečba pri liečbe chronickej polyartritídy, AIDS, niektorých nádorov, ako aj pri mnohých chirurgických zákrokoch. Genéza hypertenzie ako vedľajšieho účinku pri terapeutickom použití rekombinantného EPO zostáva nejasná. Keď sa hemodialýza vykonáva u pacientov, erytropoetínové prípravky sa zvyčajne podávajú intravenózne. V niektorých prípadoch môže byť rovnaké liečivo podané subkutánne.

Zvýšenie počtu erytrocytov pod vplyvom erytropoetínu zase vedie k zvýšeniu obsahu kyslíka na jednotku objemu krvi a tým k zvýšeniu kyslíkovej kapacity pri dodávke krvi a kyslíka do tkanív. Nakoniec sa zvyšuje výdrž tela. Podobné účinky sa dosahujú počas tréningov v stredných horách, keď nedostatok kyslíka vo vzduchu spôsobuje stav hypoxie, ktorá stimuluje tvorbu endogénneho EPO. Prirodzene, v porovnaní s použitím rekombinantného liečiva je hypoxický tréning fyziologickým mechanizmom na reguláciu erytropoézy a zlepšenie funkcie hemoglobínu na transport kyslíka, čo je vlastne účelom použitia EPO ako dopingu.

Vzhľadom na účinok erytropoetínu na kapacitu kyslíka a transport kyslíka v tkanivách táto látka spôsobuje zvýšenie pracovnej kapacity v športoch s prevládajúcim prejavom aeróbnej vytrvalosti. Medzi tieto športové disciplíny patria všetky druhy atletických behov, od 800 m, ako aj všetky druhy bežeckého lyžovania a cyklistiky. Okrem toho, nedávno, v kulturistike publikácií, informácie sa začali objavovať, že EPO môže nahradiť masívne používanie anabolických steroidov. EPO prípravky sa používajú v kombinácii so stanazololom, inzulínom a somatotropným hormónom (STH) -

Prípravky erytropoetínu sú dobre znášané farmakologické činidlá, ktoré nemajú prakticky žiadne vedľajšie účinky. Predávkovanie EPO a nekontrolované použitie však môže viesť k zvýšeniu viskozity krvi, a tým k zvýšeniu rizika porúch obehového systému, až po periférnu vaskulárnu trombózu a pľúcnu embóliu, zvyčajne smrteľnú. Riziko vzniku týchto vedľajších účinkov EPO sa zvyšuje počas tréningu v oblasti stredného veku, ako aj pri dehydratácii.

Existujú však dôkazy, že dlhodobé užívanie liekov proti erytropoetínu môže byť nebezpečné pre zdravie a niekedy aj pre život. Najmä pri použití EPO sa viažu konštantné bolesti hlavy u športovcov, ktoré sa vyvíjajú v dôsledku zahusťovania krvi a zhoršenej cirkulácie v mozgu. Okrem toho sa môže narušiť metabolizmus železa: potreba organizmu sa zvyšuje, ak je v pečeni relatívne malé množstvo. So zavedením exogénneho železa sa začne ukladať v pečeni, v dôsledku čoho sa cirhóza spojená s nadbytkom železa objaví v 20-25 rokoch.

Erytropoetín v športe [upraviť] t

História použitia rekombinantného erytropoetínu v športe (skratky rHuEPO, r-HuEPO, rhu-EPO, rEPO), ktoré sa bežne používajú vo vedeckej literatúre, sa začalo v roku 1977, keď sa erytropoetín prvýkrát čistil z ľudského moču. Zavedenie a kontrola erytropoetínu v športe a súťaži ako zakázanej drogy prešla nasledujúcimi krokmi:

  • 1985 - klonovaný gén EPO;
  • 1987 - po prvýkrát bol v Európe dostupný rekombinantný erytropoetín;
  • 1987-1990:. - s používaním EPO je spojených niekoľko úmrtí medzi holandskými a belgickými cyklistami;
  • 1988 - Medzinárodná lyžiarska federácia obsahuje erytropoetín v dopingovom zozname;
  • 1989 - FDA (Úrad pre potraviny a liečivá - štátny orgán, ktorý kontroluje výrobu a distribúciu liekov v krajine) povoľuje výrobu rekombinantného EPO;
  • 1990 - používanie erytropoetínu je zakázané MOV;
  • 1993-1994 gg. - IAAF, s aktívnou účasťou profesora M. Donika, realizuje postup odberu krvi na ôsmich súťažiach na majstrovstvách sveta;
  • 1997 - Medzinárodná cyklistická únia a Medzinárodná lyžiarska federácia schvaľujú postup selektívneho krvného testovania pred začiatkom súťaže, pričom stanovujú maximálne prípustné hladiny hematokritu a hemoglobínu. Hoci prekročenie stanovených ukazovateľov nie je dôvodom na vylúčenie, tento postup je zameraný na ochranu tela športovca pred výskytom možných komplikácií spojených so zvýšeným hemoglobínom a hematokritom;
  • 1998 - Médiá široko uviedli, že používanie cyklistického športu Tour de France je vystavené používaniu erytropoetínu v športe;
  • 1999 - Zintenzívnenie výskumu na vytvorenie spoľahlivej metódy na odhaľovanie EPO pre olympijské hry v Sydney.

Pretože prirodzený a rekombinantný erytropoetín majú takmer identickú štruktúru aminokyselín, rekombinantný erytropoetín je extrémne ťažké odlíšiť od jeho fyziologického analógu.

Na stimuláciu sekrécie vlastného erytropoetínu v Rusku sa aktívne používajú inhalácie xenónu. Na olympijských hrách v Soči 2014 dostalo mnoho ruských atlétov inhalácie xenónu pred začiatkom súťaže. Táto metóda bola antidopingovou agentúrou od mája 2014 zakázaná.

Dopingová kontrola [upraviť]

Moderný arzenál metód určených na stanovenie erytropoetínu zahŕňa priame a nepriame prístupy. Priama metóda je založená na identifikácii týchto menších rozdielov, ktoré boli zistené pri štúdiu prírodného endogénneho erytropoetínu a EPO, získaného metódou genetického inžinierstva. Niektorí výskumníci sa snažili využiť rozdiely v distribúcii elektrického náboja, ktoré sú stanovené pre tieto dva typy molekúl EPO. Na základe týchto rozdielov sa uskutočnili pokusy oddeliť dva typy molekúl pomocou kapilárnej elektroforézy. A hoci takéto oddelenie je v zásade možné, vyžaduje to veľké objemy moču (do 1 litra, ktorý je zo zrejmých dôvodov neprijateľný pre prax).

Výhodné sú nepriame metódy, ktoré vyžadujú len malé množstvá vzoriek krvi alebo moču. Príklady nepriamej metódy detekcie EPO sú nasledovné:

  • odchýlky od normálnej úrovne v biologickom prostredí vzorky. Táto skutočnosť znamená, že stanovený prebytok hladiny EPO sa musí líšiť od fyziologických alebo patologických zmien. Použitie tohto kritéria je však možné len vtedy, ak je rozsah fluktuácií indikátora dosť úzky v porovnaní s hodnotami zistenými po exogénnom podaní lieku. Toto je možné len pri použití krvi ako vzorky na dopingový test;
  • registrácia biochemických parametrov, ktorých hodnota závisí od koncentrácie erytropoetínu. Takýto prístup môže byť založený na meraní obsahu rozpustného transferínového receptora (sTfR) v sére, ktorého hladina sa zvyšuje po zavedení rekombinantného EPO. Tento ukazovateľ však podlieha podobným zmenám po tréningu v podmienkach stredných hôr;
  • stanovenie množstva fibrínu a produktov rozkladu fibrinogénu v moči po podaní EPO.

V súčasnosti je prakticky nemožné spoľahlivo identifikovať prípady exogénneho podávania erytropoetínu v tele. Preto sa na kontrolu používajú zmeny fyziologických parametrov krvi, ktoré sa zistia po podaní EPO. Medzinárodná cyklistická únia tak používa kritérium maximálnej hodnoty hematokritu (50% pre mužov). Medzinárodná lyžiarska federácia ako kritérium stanovila maximálne prípustné hodnoty hemoglobínu (165 g / l pre ženy a 185 g / l pre mužov), ako aj úroveň retikulocytov nie viac ako 0,2%. V prípade prekročenia stanovených limitných hodnôt stanovených počas kontrolného postupu pred súťažou bude príslušný športovec pozastavený z účasti na súťaži, aby sa ochránilo zdravie. Avšak hemoglobín aj hematokrit sú ukazovatele, ktoré sú ovplyvnené mnohými faktormi. Obidva tieto ukazovatele sa môžu výrazne zmeniť aj po jedinom vytrvalostnom zasadnutí s priemerným objemom. Okrem toho sa tieto ukazovatele vyznačujú výraznou individuálnou variabilitou. Preto samotné prekročenie hodnoty hematokritu viac ako 50% nemôže slúžiť ako dôkaz zneužitia erytropoetínu v športe.

Na zlepšenie kontroly užívania liekov proti erytropoetínu ako dopingu zaviedla WADA spôsob riadenia pasov športovcov. Krvný pas je jedným z vývoja WADA, ktorý je primárne zameraný na identifikáciu erytropoetínu a jeho analógov. Svojou pomocou tvorí jednotný počítačový hematologický profil každého športovca v 30 rôznych ukazovateľoch, pre začiatočníkov, v tých športoch, kde je potrebná vytrvalosť. Už 10 krajín sa pripojilo k zavedeniu a zdokonaleniu programu pasov, vrátane Švédska, Nórska, Kanady a Nemecka. Ruská antidopingová agentúra túto iniciatívu schvaľuje, ale bude ju realizovať po finalizácii všetkých medicínskych a právnych aspektov.

V prípade testov vykonaných na pasoch športovca WADA odporúča používanie zariadenia od spoločnosti Sysmex (Japonsko) alebo pobočky ERMA. Táto značka plne automatických hematologických analyzátorov najnovšej generácie získala maximálny index spoľahlivosti v presnosti krvných indikátorov.

Počas intenzívneho tréningu a profesionálneho športu je potrebné neustále vykonávať hematologickú analýzu s cieľom určiť počet červených krviniek a ich parametre (objem, saturácia hemoglobínom), hladinu hemoglobínu a hematokrit. Hematokrit by sa nemal zvyšovať nad 50% - to vedie k zahusťovaniu krvi, ktorá je zase plná zhoršujúcej sa mikrocirkulácie vo svaloch a vnútorných orgánoch, čím sa zvyšuje riziko trombózy (tendencia k trombofilii môže byť hodnotená markerom D-diméru). Okrem toho je nevyhnutná úplná kontrola metabolizmu železa (koncentrácia železa v sére, celková a nenasýtená väzbová kapacita železa, percento saturácie železa, transferín, feritín, C-reaktívny proteín) a stanovenie hladiny kyseliny listovej a vitamínu B12 v krvi. Všetky tieto zlúčeniny sú nevyhnutné pre správnu erytropoézu a ich nedostatok by nemal byť povolený počas športu. Okrem vyššie uvedených testov je potrebná kontrola hladiny erytropoetínu.

Pozri tiež [upraviť]

Upozornenie [upraviť]

Anabolické lieky možno používať len na lekársky predpis a sú kontraindikované u detí. Poskytnuté informácie nevyžadujú použitie alebo distribúciu účinných látok a sú zamerané výlučne na zníženie rizika komplikácií a vedľajších účinkov.

Epo, čo to je

Erytropoetín ako droga

Čo je erytropoetín? Erytropoetín (EPO) je glykopeptidový hormón, ktorý reguluje tvorbu červených krviniek (erytrocytov) z kmeňových buniek kostnej drene v závislosti od spotreby kyslíka. Erytropoetín samotný je produkovaný hlavne obličkovým tkanivom.

Molekula erytropoetínu pozostáva z aminokyselín. V štyroch miestach sú glykozidové fragmenty pripojené k proteínovému reťazcu pomocou vhodných väzieb. Sú to rôzne cukry, takže existuje niekoľko odrôd EPO s rovnakou biologickou aktivitou, ale ich fyzikálno-chemické vlastnosti sú trochu odlišné.

Rekombinantný (syntetický) ľudský erytropoetín, získaný genetickým inžinierstvom (skratky rHuEPO, r-HuEPO, rhuEPO, rEPO) bežne používané vo vedeckej literatúre, je v zložení aminokyselín identický s prirodzeným ľudským EPO. Existujú však malé rozdiely v zložení glykozidových fragmentov. Tieto rozdiely určujú acidobázické vlastnosti celej molekuly hormónu.

1977 Po prvýkrát sa EPO v purifikovanej forme izoluje z ľudského moču.

1988 Začiatok sériovej produkcie rekombinantného EPO.

1988-1990 gg. Niekoľko úmrtí medzi holandskými a belgickými cyklistami je spojené s používaním EPO.

1990 Uplatňovanie EPO zakázané MOV.

1993-1994 gg. IAAF vykonáva postup odberu krvi v ôsmich etapách Grand Prix.

1998 Zverejnenie používania EPO na cyklistickom preteku Tour de France je široko pokryté médiami.

Akcia EPO. EPO stimuluje premenu retikulocytov na zrelé erytrocyty v zložení hematopoetického kostného drene. Zvýšenie počtu červených krviniek vedie k zvýšeniu obsahu kyslíka na jednotku objemu krvi a tým k zvýšeniu kapacity kyslíka a prívodu kyslíka do tkanív. Nakoniec sa zvyšuje výdrž tela. Podobné účinky sa dosahujú počas tréningu v stredných oblastiach.

Na aké účely sa rhEPO používa v medicíne? V tele sa tvorí EPO v obličkách. Preto pacienti s chronickým zlyhaním obličiek vždy trpia anémiou. Pred príchodom rekombinantného EPO sa u týchto pacientov pravidelne vykonávali krvné transfúzie plnej krvi a červených krviniek. Od roku 1989 však potreba takýchto postupov zanikla, pretože boli nahradené zavedením prípravkov EPO. V niektorých prípadoch je anémia iného pôvodu tiež úspešne liečená rekombinantným EPO. Ako alternatíva k transfúzii červených krviniek je liečba vysokými dávkami EPO účinným anti-anemickým opatrením pri liečbe chronickej polyartritídy, AIDS, určitých nádorov, ako aj pri chirurgických zákrokoch a strate krvi.

V ktorých športoch je rekombinantný EPO používaný ako doping? Vzhľadom na významný vplyv EPO na kyslíkatú kapacitu krvi a na dodávku kyslíka do tkanív, tento liek prispieva k zlepšeniu výkonu v tých športových disciplínach, ktoré vyžadujú aeróbnu vytrvalosť - to sú všetky druhy atletiky od 800 m, ako aj lyžovanie a cyklistické preteky.
Aký je stupeň rizika v dôsledku použitia rekombinantného EPO? Rh-EPO je dobre tolerovaný farmakologický liek, ktorý nemá prakticky žiadne vedľajšie účinky. Predávkovanie EPO a nekontrolované použitie však môže viesť k zvýšeniu viskozity krvi a následne k zvýšenému riziku porúch v cievnom krvnom systéme srdca a mozgu. Riziko vzniku týchto vedľajších účinkov EPO sa zvyšuje počas tréningu v oblasti stredného veku, ako aj pri dehydratácii.

Je možné zistiť stopy používania rekombinantného EPO?

V súčasnosti neexistujú overené metódy spoľahlivého zisťovania stôp používania EPO športovcami ako dopingu. Pretože prirodzené a rekombinantné erytropoetíny majú identickú štruktúru aminokyselín, rh-EPO je takmer nerozoznateľný od svojho prirodzeného náprotivky.

Moderný arzenál metód určovania EPO zahŕňa priame a nepriame prístupy. Priama metóda je založená na separácii prírodného EPO a EPO, získaného metódou genetického inžinierstva, na základe tých malých rozdielov, ktoré boli zistené počas ich štúdie. Spôsob elektroforetickej separácie môže ukázať najmä distribúciu rôznych izoforiem erytropoetínu, ktoré majú rôzne glykozidové fragmenty. Prírodný EPO je prevažne spojený s glykozidovými časťami s vyššou kyslosťou, zatiaľ čo rekombinantné skupiny sú spojené so skupinami, ktoré majú alkalické vlastnosti. Metóda čistenia vzorky moču a separácie je pomerne komplikovaná a vyžaduje veľké množstvo moču (až do 1 litra). V dôsledku toho sa uprednostňujú nepriame metódy, ktoré vyžadujú len malé množstvá vzoriek krvi alebo moču.

Príklady nepriamej detekcie EPO:

  • Odchýlky od normálnej úrovne obsahu biofluidu. Táto skutočnosť znamená, že stanovený prebytok hladiny EPO sa musí líšiť od prípustných odchýlok fyziologického alebo patologického charakteru. Použitie tohto kritéria je však možné len vtedy, ak je rozsah fluktuácie indikátora malý v porovnaní s hodnotami, ktoré sa zistili po exogénnom podaní lieku. Toto je možné len pri použití krvi ako vzorky na dopingový test.
  • Registrácia biochemických parametrov, ktorých hodnota závisí od koncentrácie EPO. Takýto prístup môže byť založený na meraní obsahu rozpustného transferínového receptora (sTfR) v sére, ktorého hladina sa zvyšuje po zavedení rekombinantného EPO. Tento ukazovateľ však podlieha podobným zmenám po tréningu v podmienkach stredných hôr.
  • Stanovenie degradačných produktov fibrínu a fibrinogénu v moči po podaní EPO.

Dopingová kontrola prípadov zneužívania EPO.

V súčasnosti je prakticky nemožné spoľahlivo identifikovať prípady exogénneho podávania EPO do tela. Preto sa na predbežnú kontrolu používajú zmeny vo fyziologických parametroch krvi, ktoré sa zistia po podaní EPO. Medzinárodná cyklistická únia teda používa kritérium maximálnej hodnoty hematokritu (50% objemu pre mužov). Medzinárodná lyžiarska federácia ako kritérium stanovila maximálne hodnoty hemoglobínu (16,5 g% pre ženy a 18,5 g% pre mužov).

V prípade prekročenia predpísaných limitných hodnôt stanovených počas kontrolného postupu pred súťažou, bude príslušný súťažiaci pozastavený z účasti na súťaži, aby ochránil svoje zdravie. Avšak hemoglobín aj hematokrit sú ukazovatele, ktoré sú ovplyvnené mnohými faktormi.

Najmä sa môžu výrazne zmeniť aj po jednom tréningu na vytrvalosť priemerného objemu. Okrem toho sa tieto ukazovatele vyznačujú výraznou individuálnou variabilitou. Preto ani prekročenie hodnoty hematokritu viac ako 50% objemu nemôže slúžiť ako dôkaz zneužitia EPO.

O Nás

Aké telo produkuje inzulín? Iste, väčšina ľudí pozná odpoveď na otázku, ale nie každý má zvláštnosti procesu a funkcií hormonálneho akumulátora.